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                                        人雌二醇(E2)ELISA試劑盒

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                                        上海莼試實業有限公司為您提供人雌二醇(e2)elisa試劑盒。人雌二醇(e2)elisa試劑盒操作步驟
                                        1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l。
                                        2. 加樣:分別設空白孔空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl樣品終稀釋度為5倍。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
                                        3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
                                        4. 配液:將3048t的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備用。
                                        5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
                                        6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
                                        7. 溫育:操作同3。
                                        8. 洗滌:操作同5。
                                        9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
                                        10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應此時藍色立轉黃色。
                                        11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度od值。 測定應在加終止液后15分鐘。

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